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肠愈宁对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织claudin-1、ZO-1、occludin蛋白表达的影响

张冰 谢晶日 孙涛

张冰, 谢晶日, 孙涛. 肠愈宁对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织claudin-1、ZO-1、occludin蛋白表达的影响[J]. 中华全科医学, 2021, 19(9): 1447-1450, 1577. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.002082
引用本文: 张冰, 谢晶日, 孙涛. 肠愈宁对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织claudin-1、ZO-1、occludin蛋白表达的影响[J]. 中华全科医学, 2021, 19(9): 1447-1450, 1577. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.002082
ZHANG Bing, XIE Jing-ri, SUN Tao. Effects of Changyuning Decoction on protein expression of claudin-1, ZO-1 and occludin in colonic tissue of rats with ulcerative colitis[J]. Chinese Journal of General Practice, 2021, 19(9): 1447-1450, 1577. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.002082
Citation: ZHANG Bing, XIE Jing-ri, SUN Tao. Effects of Changyuning Decoction on protein expression of claudin-1, ZO-1 and occludin in colonic tissue of rats with ulcerative colitis[J]. Chinese Journal of General Practice, 2021, 19(9): 1447-1450, 1577. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.002082

肠愈宁对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织claudin-1、ZO-1、occludin蛋白表达的影响

doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.002082
基金项目: 

国家自然科学基金项目 81904152

中国博士后科学基金项目 2017M611410

浙江省中医药科技计划项目 2021ZQ073

详细信息
    通讯作者:

    孙涛,E-mail:326516058@qq.com

  • 中图分类号: R574.62  R-332

Effects of Changyuning Decoction on protein expression of claudin-1, ZO-1 and occludin in colonic tissue of rats with ulcerative colitis

  • 摘要:   目的  探讨肠愈宁对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织紧密连接(TJ)关键蛋白咬合蛋白(occludin)、闭合蛋白-1(claudin-1)、带状闭合蛋白-1(ZO-1)表达的影响。   方法  将60只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、肠愈宁组、美沙拉嗪组,每组各15只。采用2, 4, 6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇复合液(100 mg/kg TNBS+50%乙醇0.25 mL)一次性灌肠制备UC大鼠模型,造模成功后,药物干预7 d。光镜下观察大鼠结肠组织病理形态学变化,透射电镜观察大鼠结肠黏膜超微结构,免疫荧光染色法观察大鼠结肠组织occludin、claudin-1、ZO-1蛋白荧光强度。   结果  光镜与电镜观察显示,模型对照组大鼠结肠黏膜充血、水肿,炎症渗出明显,细胞间紧密连接断裂;而经肠愈宁干预后,大鼠结肠黏膜病理状态明显改善,细胞间紧密连接少部分断裂。免疫荧光染色结果显示,模型对照组大鼠结肠组织claudin-1、ZO-1、occludin蛋白荧光强度(0.11±0.01、0.11±0.01、0.09±0.01)较空白对照组明显降低(0.14±0.01、0.15±0.03、0.13±0.00,均P<0.05);经肠愈宁干预后,大鼠结肠组织claudin-1、ZO-1、occludin荧光强度较模型对照组明显升高(0.13±0.00、0.14±0.02、0.12±0.01,均P<0.05)。   结论  肠愈宁可通过上调TJ关键蛋白claudin-1、ZO-1、occludin的表达修复结肠黏膜损伤,治疗UC。

     

  • 图  1  各组大鼠结肠组织病理结果(HE染色)

    注:黑色箭头为炎症细胞,红色箭头为红细胞,蓝色箭头显示隐窝结构异常,绿色箭头为杯状细胞。A为空白对照组,×100;B为模型对照组,×100;C为美沙拉嗪组,×100;D为肠愈宁组,×100;E为空白对照组,×400;F为模型对照组,×400;G为美沙拉嗪组,×400;H为肠愈宁组,×400。

    图  2  各组大鼠结肠黏膜超微结构变化

    注:A为空白对照组,×5 900;B为模型对照组,×5 900;C为美沙拉嗪组,×5 900;D为肠愈宁组,×5 900;E为空白对照组,×10 000;F为模型对照组,×10 000;G为美沙拉嗪组,×10 000;H为肠愈宁组,×10 000。

    表  1  各组大鼠claudin-1、ZO-1、occludin荧光强度比较(x ±s,IntDen/Area)

    组别 只数 claudin-1 ZO-1 occludin
    空白对照组 15 0.14±0.01 0.15±0.03 0.13±0.00
    模型对照组 14 0.11±0.01a 0.11±0.01a 0.09±0.01c
    美沙拉嗪组 14 0.12±0.01 0.12±0.01 0.10±0.00
    肠愈宁组 14 0.13±0.00b 0.14±0.02b 0.12±0.01d
    F 5.446 2.622 33.971
    P 0.025 0.123 <0.001
    注:与空白对照组比较,aP<0.05,cP<0.01;与模型对照组比较,bP<0.05,dP<0.01。
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  • 收稿日期:  2020-02-19
  • 网络出版日期:  2022-02-15

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