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周期蛋白D1基因沉默对骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响

赵志 吴敏 官建中 朱仲廉 赖桂华 陈传好

赵志, 吴敏, 官建中, 朱仲廉, 赖桂华, 陈传好. 周期蛋白D1基因沉默对骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响[J]. 中华全科医学, 2017, 15(8): 1308-1312,1391. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2017.08.010
引用本文: 赵志, 吴敏, 官建中, 朱仲廉, 赖桂华, 陈传好. 周期蛋白D1基因沉默对骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响[J]. 中华全科医学, 2017, 15(8): 1308-1312,1391. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2017.08.010
ZHAO Zhi, WU Min, GUAN Jianzhong, ZHU Zhonglian, LAI Guihua, CHEN Chuanhao. Effects of Cyclin D1 gene silencing on apoptosis and proliferation of chondrocytes in osteoarthritis:an in vitro study in rats[J]. Chinese Journal of General Practice, 2017, 15(8): 1308-1312,1391. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2017.08.010
Citation: ZHAO Zhi, WU Min, GUAN Jianzhong, ZHU Zhonglian, LAI Guihua, CHEN Chuanhao. Effects of Cyclin D1 gene silencing on apoptosis and proliferation of chondrocytes in osteoarthritis:an in vitro study in rats[J]. Chinese Journal of General Practice, 2017, 15(8): 1308-1312,1391. doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2017.08.010

周期蛋白D1基因沉默对骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响

doi: 10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2017.08.010
基金项目: 

安徽省教育厅高校自然科学研究重点项目(KJ-2017A-211)

详细信息
    通讯作者:

    赖桂华,E-mail:lailgh198272@foxmail.com

  • 中图分类号: R684.3;R329.28

Effects of Cyclin D1 gene silencing on apoptosis and proliferation of chondrocytes in osteoarthritis:an in vitro study in rats

  • 摘要: 目的 研究周期蛋白D1(Cyclin D1)表达沉默对骨关节炎(OA)软骨细胞的增殖和凋亡的影响。方法 从健康的成年大白鼠分离软骨细胞,并进行人工培养。采用甲苯胺蓝染和Ⅱ型胶原免疫组化筛选软骨细胞。构建表达Cyclin D1-siRNA的质粒。在软骨细胞中通过IL-1 β诱导产生OA模型。软骨细胞被分为:空白控制组,IL-1 β诱导组(OA模型组),IL-1 β诱导实验组(OA实验组,Cyclin D1-siRNA转染),IL-1 β诱导的阴性控制组(OA阴性控制组,阴性转染)。每组细胞培养了24 h、48 h、72 h、96 h,且用细胞计数试剂盒量化细胞增殖。用流式细胞术检测细胞周期与凋亡。用qRT-PCR和Western blotting检测细胞中Cyclin D1、mRNA和蛋白质的表达。结果 细胞增殖测定结果表明,相较于培养了24 h的软骨细胞,72 h和96 h的软骨细胞增殖速度更加显著。和空白控制组相比,培养72 h和96 h的OA模型组、OA实验组和OA阴性控制组的细胞增殖速度显著下降。OA模型组细胞增殖在48 h、72 h和96 h显著低于OA实验组、OA阴性控制组。流式细胞术表明,相比较于空白控制组,OA模型组、OA实验组、OA阴性控制组中细胞凋亡率更高。相比较于OA模型组和OA阴性控制组,OA实验组细胞凋亡率增加。相关Cyclin D1 mRNA和蛋白质表达,在OA实验组中,显著低于空白控制组、OA阴性控制组和OA模型组。结论 Cyclin D1基因表达沉默能够抑制OA软骨细胞的增殖和增强OA软骨细胞的凋亡。

     

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出版历程
  • 收稿日期:  2017-03-27
  • 网络出版日期:  2022-08-05

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